MERCK - CHROMOCULT COLIFORM AGAR ES (SELETIVIDADE AUMENTADA) - EMB 500G

CHROMOCULT COLIFORM AGAR ES (SELETIVIDADE AUMENTADA) MERCK
APROVADO PELA AOAC LICENÇA N° 041002
RENDIMENTO 34,5g/L
Embalagem 500g.

Composição Típica (g/litro)
Peptona 5.0; cloreto de potássio 7,5; MOPS 10.0; sais biliares 1,15; propionato 0,5; Ágar-Ágar 10,0; 6-Cloro-3-
indoxil-beta-Dgalactopiranósido 0,15; isopropil-beta-D-tiogalactopiranósido 0,1; 5-bromo-4-cloro-3-indoxil-
ácido beta-D-glucurônico 0,1.

Preparação
Suspender 34,5 g em 1000 ml de água purificada e aquecer até à ebulição com agitação frequente até dissolver completamente (aproximadamente 45 minutos).
Não autoclave, não superaqueça.
Resfrie imediatamente o meio em banho-maria a 45-50°C (aparece um precipitado se um período de 2 horas for excedido).
pH: 7,0 ± 0,2 a 25°C
O meio é límpido e incolor.

Preparação de amostra
Prepare amostras de teste usando técnicas laboratoriais padrão, como as descritas na Bacteriologia
Manual Analítico ou norma ISO específica do produto em questão.
Para minimizar possíveis interferências entre a coloração de coliformes/E. coli e a amostra (por exemplo, pH baixo), é
É aconselhável diluir a amostra 1:10 em uma solução tamponada (por exemplo, adicionar 450 ml de tampão fosfato de Butterfield, água peptonada tamponada ou caldo peptonado de cloreto de sódio tamponado ao frasco do liquidificador contendo 50 g de amostra e misturar por 2 min) e depois realizar diluições adicionais como necessário.

Aplicativo
O Chromocult® Coliform Agar ES é geralmente inoculado pelo método de vazamento em placa.
Usando uma pipeta estéril, transfira 1 ml da amostra líquida de teste (ou 1 ml da diluição apropriada) para uma placa de Petri estéril.
Despeje em cada placa de Petri aproximadamente 15 ml de Ágar Coliforme Chromocult® enquanto o meio ainda está liquefeito,
mas somente após o meio ter sido resfriado a 45-50°C em banho-maria. Agite cuidadosamente a placa até que o inóculo esteja completamente misturado com o meio. Deixe a mistura solidificar em uma superfície horizontal fria.
Incubar as placas inoculadas em condições aeróbias a 35-37°C numa posição invertida (ágar para cima) durante 24 horas.
Após a incubação, examine as placas quanto à presença de colónias típicas de E. coli e outros coliformes.

Resultados
Conte as colônias azuis escuras a violetas como E. coli e as colônias de salmão a vermelhas como outros coliformes.
O total de todas as colônias vermelhas e azuis é a contagem total de coliformes.
Algumas E. coli (3-4%) são negativas para ß-glucuronidase e crescem como colônias vermelho-salmão, por ex. Cepas de E. coli O157.
A flora acompanhante aparece como colônias incolores, exceto alguns organismos, que possuem ß-D-glucuronidase
atividade. Essas colônias aparecem na cor azul claro a turquesa.
A contagem total de coliformes não deve exceder 150 UFC típicas e 300 UFC totais (coliformes totais e bactérias acompanhantes) por placa. Acima destes níveis, as colónias não podem ser contadas com precisão. As amostras que se espera que excedam estes níveis máximos devem ser diluídas antes da inoculação.